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關于色譜的重現性、重復性問題該是豁然開朗的時候了！

來源：實驗與分析時間：2015-04-20 22:50:14 瀏覽：6015次

本文授權轉載自實驗與分析

關于色譜的重現性、重復性問題該是豁然開朗的時候了！

很多實驗室分析人員在面對精確度、重現性、重復性這些定義的時候都會犯迷糊，到底重復性、重現性該如何區(qū)分?今天以后就沒理由再傻傻分不清楚了，請看下面小編幫你理順的吧：

精密度是指在規(guī)定的測試條件下，同一個均勻供試品，經多次取樣測定所得結果之間接近的程度。

精密度的表示方法

氣相色譜法和高效液相色譜法是對同一供試液進行至少五次以上的測定;精密度一般用相對標準偏差 (relative standard deviation, RSD) 表示： RSD= 標準偏差/平均值 * 100 %

精密度報告的數據應包括平均值、可信限及相對標準偏差。

一般在一天之內進行的精密度考察稱為日內精密度 (inter-day variability) ;在三天之內進行的精密度考察稱為日間精密度 (intra-day variability) 。

有時為了考察隨機變動因素對精密度的影響，還需設計進行中間精密度試驗，變動因素包括不同日期、不同分析人員和不同設備。

重復性： 主要目的是為了驗證所選用的方法對樣品進行測定時，檢測結果的精密程度(可以用3個不同濃度的溶液，每個濃度制備3份，或是用100%的濃度溶液不少于6個的結果進行評價)。

重現性： 主要目的是為了驗證針對同一樣品檢測時，所選用的方法的精密程度(可用同一個樣品溶液連續(xù)進樣6次的結果進行評價)。

簡言之就是：

重復性：同一個人，同一臺儀器，在一定時間內的樣品精密程度

重現性：不同實驗室，或不同操作人員，或不同儀器上的精密程度。

網友疑問解答：

不同實驗室由不同分析人員測定結果之間的精密度，稱為重現性。狹義來說，同一實驗室，相同或不同的人，用不同的儀器做的結果也可以說是重現性。重現性差有很多原因。比如柱子性能的不同。就算是同一型號柱子也會有差別。還有和流動相配制的溶劑、水有關。還有和儀器本身的性能，比如說死體積不同，不同廠家的檢測器的檢測限不同等多方面原因。還有可能是操作有關，比如外標分析時用的自動進樣小瓶裝樣過多，導致進樣量有偏差。

如果重復性差的話，要想好很多的可能性，挨個排除，主要和泵有關，還有就是進樣量，還有就是系統(tǒng)沒有平衡好，還有可能是流動相不均勻，沒過濾好，還可能是有氣泡，再就是柱效差，或是方法不合適導致的峰型不好，還有可能就是樣品檢測線性不好。排除以上可能就是你儀器的性能不好了。

問題：

1、我做液相色譜平行樣的時候，從來沒出現過兩次類似的情況，出峰位置基本都在誤差允許范圍，主要是峰面積相差巨大，而且都是第一次進樣那時候峰面積最大，第二次就會明顯變小，然后后面幾次進樣一直也都蠻小，而且互相之間也有蠻大的差距，這到底是什么原因?會是儀器自身不穩(wěn)定?進樣瓶會不會對主成分存在吸附呢?有沒有可能是主成分穩(wěn)定性不好呢?

2、用得是5ml容量瓶，應該不會吸附，測的是苯胺類化合物，半揮發(fā)性，可是再換一種流動相的時候，第一次進樣峰面積并不小，再進樣峰面積變小，然后再換一個流動相,第一次進樣峰面積又不會變小，怎么回事?

建議：

其他條件都一樣的話，應該是樣品的量在溶解，或者流動相隨著時間在變化，試試將樣品衍生化再進樣。應該是你的主成分揮發(fā)或是分解的原因。如果流動相放的時間太長致使組成輕微變化，或者機器工作時間長升溫了，都會使RT變化的，想想你的過程，有沒有這方面的原因。

三次進樣明顯有吸收值變化的問題，但是出峰時間相差不大，這個也可能是因為你的樣品隨著時間的變化發(fā)生的三者間的轉化或樣品的揮發(fā)。

另外要考慮樣品是不是現配現做的，還是配了一個樣品連續(xù)做三次，剩下的放在冰箱里，如果是這樣的話有可能是濃度變小了?？梢杂昧硗庖慌_儀器試下，如果重現性好的話，可排除這種狀況。

編者話：

關于色譜儀器，可以說是所有從事實驗室的分析人員們接觸最多也是最熟悉的儀器類別，但是各種各樣的問題還是會定期的接踵而至，你總會發(fā)現：還是有些這樣那樣的問題是你所搞不定的，所以如果你有什么工作中的疑惑，或是你想在微信公眾賬號中有想了解到的知識，請告訴我們，小編會盡自己所能，奉獻自己的時間為您整理!

免責聲明：本資源來源于實驗與分析，版權歸原作者所有，本文僅作交流學習之用，不作任何商業(yè)用途，若有侵權，請聯系刪除，謝謝理解！

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